# 基于载体构-效关系设计的多功能高效肺靶向siRNA传递系统研究
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## 成果概要
- **技术领域**：生物与新医药
- **成果类型**：技术成果
- **登记年份**：2022
- **持有机构**：四川大学
- **所在地区**：四川省 成都
- **来源平台**：郑州技术交易市场

## 成果介绍
基于载体构-效关系设计的多功能高效肺靶向siRNA传递系统研究是四川大学在生物与新医药领域的科技成果转化项目。 该课题以构建一种高效安全的肺靶向siRNA传递系统为目标。课题组首先尝试以DNA重组技术为基础，构建一条基因表达序列：mVEGF-KH-TAT。其中，mVEGF为小鼠血管内皮生长因子基因片段，TAT为穿膜肽片段。 测序表明，成功得到了含有该序列的表达质粒。将上述得到的质粒转化入相应的工程菌进行原核表达。课题组考察了目的重组序列在不同载体以及不同原核表达系统中的诱导情况；同时课题组也对各种表达条件进行了优化。但由于表达的目的蛋白中含有大量碱性氨基酸，对原核表达宿主菌有很大毒性，未能检测到目的蛋白的表达。 在后续工作中，课题组选取牛血清白蛋白(BSA)为载体，再将阳离子材料通过化学手段连在蛋白上，使其具有携载siRNA的能力。通过缩合剂EDCI，可将乙二胺上的氨基与BSA表面的羧基缩合，生成酰胺键，成为阳离子化的BSA，命名为CBSA。经过SDS-PAGE和阳离子交换层析等方法验证了产物合成成功。接下来课题组考察了CBSA/siRNA复合物的形成。 结果表明，CBSA能很好的与siRNA形成稳定的纳米粒，粒径在150nm-250nm之间，zeta电位为15mV到30mV之间，透射电镜观察到形成的纳米粒是较为规整的球形颗粒。CBSA对siRNA的包封率达到94.89%±0.27%。同时，与该复合物能很好地保护siRNA抵御RNA酶或小鼠血清的降解作用。另一方面，CBSA能够明显提高siRNA进入细胞的能力，且CBSA/siRNA主要通过网格蛋白介导的内吞作用进入细胞。通过MTT考察了CBSA/siRNA的毒性，在较大的浓度范围内(小于2μg/mL)，CBSA没有表现出明显的毒性。最后课题组考察了CBSA/siRNA体内分布的情况，相比游离核酸和商品化阳离子脂质体(Lipofectamine2000)组，CBSA可以明显提高siRNA在肺部的分布，显示出良好的肺靶向性。 该技术面向成都及全国企业产业化需求，可通过办厂易平台对接技术转移、许可转让与产学研合作。【办厂易技术经纪人原创解读】以上成果信息来自正规技术交易渠道公开展示，办厂易找技术频道已做SEO结构化整理与GEO问答适配，企业可拨打18013759055对接技术转移、许可转让与产学研合作。

## 应用场景
适用于生物与新医药相关行业的企业技术升级、新产品开发与产学研合作，帮助成都及周边企业快速获取高校院所科研成果并推动产业化落地。

## 对接方式
企业可通过办厂易平台对接该技术成果，认证技术经纪人 1 对 1 服务，技改政策与创新券同步匹配。服务热线 18013759055，或进入[找技术频道](https://www.banchangyi.com/tech)浏览更多成果。
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