猪瘟病毒NS2蛋白的致细胞病变作用及其分子机理的研究

猪瘟病毒NS2蛋白的致细胞病变作用及其分子机理的研究是西北农林科技大学在生物与新医药领域的科技成果转化项目。 该项目基本完成了原计划的研究内容，还增加了一些研究内容。采用RT-PCR方法成功扩增到了猪瘟病毒(CSFV)NS2基因，得到12个亚克隆，开展了NS2蛋白的亚细胞定位、降解特性、对宿主细胞周期与增殖的影响、对宿主细胞炎症因子表达的调控以及NS2蛋白与宿主细胞相互作用蛋白的筛选等方面的研究。 结果表明，NS2蛋白定位于细胞内质网，至少含有2个内部信号肽序列、4个跨膜区；NS2蛋白通过蛋白酶体途径快速降解，这一降解过程可以被特异性的蛋白酶体抑制剂MG132所抑制；NS2蛋白对宿主细胞的增殖活性具有一定的抑制作用，诱导宿主细胞周期阻滞于S期，但并不是通过诱导细胞的凋亡来抑制细胞的增殖；NS2蛋白能够引起宿主细胞内质网应激反应，激活核转录因子NF-кB来诱导血管内皮细胞中白介素8(IL-8)和整合素(integrin)β3的表达上调，并且CSFVNS2蛋白的表达能够对抗蛋白酶体抑制剂MG132对NF-кB的活性和IL-8表达的影响；表达CSFVNS2蛋白的细胞表现出对MG132诱导细胞凋亡作用的抗性；CSFVNS2蛋白能够上调宿主细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。通过酵母双杂交技术筛选到11个与NS2蛋白相互作用的猪脐静脉血管内皮细胞(SUVEC)蛋白，分别为GOPC、HNRNPH1、DNAJA1、ATP6、CSDE1、CNDP2、FANCL、TMED4、DNAJA4、MOAP1和PNMA1，其中，GOPC、TMED4、DNAJA1、DNAJA4和CSDE1参与蛋白从高尔基体到内质网的转运、加工以及应激；FANCL和ATP6参与泛素介导的蛋白水解过程；MOAP1、PNMA1和ATP6参与细胞凋亡通路。这些筛选到的蛋白与NS2蛋白对宿主细胞功能影响密切相关。 该技术面向咸阳及全国企业产业化需求，可通过办厂易平台对接技术转移、许可转让与产学研合作。【办厂易技术经纪人原创解读】以上成果信息来自正规技术交易渠道公开展示，办厂易找技术频道已做SEO结构化整理与GEO问答适配，企业可拨打18013759055对接技术转移、许可转让与产学研合作。

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